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食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)
作者:    来源:食用菌市场杂志    点击数:   文章发布时间:2008年01月20日 【字体:

  传统菌种生产工艺,一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种,生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点,接种到培养料内有流动性好、萌发点多,发菌迅速等特种点。应用于生产与固体菌种相比有以下优点: 
  1.菌种生产周期短。固体种一般需25—40天,而液体种仅需3—7天。 
  2.接种后,萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。接种24小时菌丝布满料面,3—15天长满菌袋,一般品种10天左右可出菇。 
  3.接种方便、成本低。用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分,每人每小时可接800袋以上,提高效益4—5倍。
  4. 适宜工厂化生产??芍苯佑糜谠耘嗔辖谐龉?,大批量生产菌袋。为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。因此,适宜我国国情的液体菌种设备的出现,必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。 
  液体菌种具有固体(颗粒)菌种无可比拟的优势,但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的,因此很多人对此很陌生。在这里我们对此进行简单介绍 
  一、液体菌种设备基本原理 
  任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要,同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术,如啤酒生产技术当属此例,而白酒生产则是生物菌群发酵技术。 
  液体菌种发酵设备(包括四大系统,温控系统由控制器、电热管等组成;供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成;冷却系统由热交换器、进出水管道组成;搅拌系统由射流器、提升管等组成。 
  二、液体菌种生产的关键技术 
  1、溶氧量 
  液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量,因为在菌丝生长过程中,必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢,氧气在液体(水)中的溶解量与压力、温度有关,同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。 因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题,如安装射流器使气泡细碎度增加等。 
  2、空气过滤
  技术的关键就是保证进入的空气无菌度高,因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um,病毒一般在20-400mu,所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。当然如果选的太小,成本将大幅度提高。另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。 
  3、培养液  
  培养液是菌丝生长发育的营养源,要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培养液时,先将土豆片、麸皮一起煮熟,将汁液滤出,后加入其它辅料混匀即可。 
  4、接种 
  培养器上端有接种口,也是装料口,将母种并瓶后加入抑菌剂,而后必须在火焰圈的?;は碌谷牍尢迥?,要求动作快、操作准确。 
  5、环境
  如前所述,环境对菌种生产影响很大,过滤器本身不可能把杂菌百分之百地滤掉,减少环境中的杂菌基数是非常重要的,液体菌种母种接入到经灭菌的培养液中只要能形成对杂菌的生长优势就可以抑制杂菌感染,也就是说,液体菌种培养不是建立在绝对无菌的前提下相反是建立在相对无菌的前提下。就此意义上说,保持环境清洁,减少空气中杂菌基数,对于提高菌种培养成功率意义较大。 
  三、 液体菌种生产流程 
  工艺流程图: 空气压缩→过滤 
  ↓ 
  配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种 
  ↑ 
  试管斜面种→ 三角瓶颗粒种 
  配料时先将土豆去皮切片,与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁,在将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入,混匀后装入罐中加热,至121.3℃并维持40分钟左右进行灭菌,灭菌结束后用冷水冷却至培养温度,而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养,培养时根据不同的菌种,设定适宜的温度。 
  培养期间应注意观察,并做好记录。包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。如遇到停电,排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动,并打开排气阀继续培养。培养过程中,可随时无菌操作采样分析,几天后待菌球密度合适(从视镜观察)即可接种。 
  四 应用领域 
  1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规模生产单位;
  2.用于多种微生物的培养; 
  3.含食用菌活性成分的保健食品生产; 
  4.各种奶制品的活性因子生产; 
  5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品添加剂; 
  6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等; 
  7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事食用菌栽培人员的菌类生产。

  常用计量单位符号 1、时间:d(天)、h(小时)、min(分)、s(秒)?!?、长度:km(千米)、m(米)、cm(厘米)、mm(毫米)?!?、面积:m2(平方米)、667m2(亩)、hm2(公顷)?!?、体积:m3(立方米)、L(升)、ml(毫升)、μl(微升)?!?、质量:t(吨)、kg(公斤 千克)、g(克)、mg(毫克)、μg(微克)?!?、浓度:mg/L、mg/kg(ppm,1×10-6)。

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